等度液相色譜分析儀是一種高效液相色譜儀(HPLC)的類型,它利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對(duì)樣品中的化合物進(jìn)行分離和分析。在等度液相色譜中,流動(dòng)相的組成和比例在分析過(guò)程中保持恒定,因此得名“等度”。
等度液相色譜分析儀的工作原理基于樣品分子在固定相和流動(dòng)相之間的分配和吸附作用。樣品溶液被注入色譜柱后,樣品中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。由于各組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)不同,它們?cè)谏V柱中的移動(dòng)速度也會(huì)不同,從而實(shí)現(xiàn)組分的分離。分離后的組分依次進(jìn)入檢測(cè)器,檢測(cè)器將樣品組分的信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào),經(jīng)過(guò)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄和分析,最終生成分析報(bào)告。
1、高壓輸液系統(tǒng):
組成:包括貯液器、高壓泵、過(guò)濾器及脫氣裝置。
功能:
貯液器:存儲(chǔ)高純度溶劑(流動(dòng)相),需采用耐腐蝕、對(duì)溶劑呈惰性的材料制成,并配備過(guò)濾器防止顆粒進(jìn)入泵內(nèi)。
高壓泵:作為驅(qū)動(dòng)溶劑和樣品通過(guò)色譜柱及檢測(cè)系統(tǒng)的高壓源,其性能直接影響分析結(jié)果的可靠性。
脫氣裝置:防止流動(dòng)相中的氣泡進(jìn)入檢測(cè)器,避免噪聲增加或檢測(cè)異常。等度分析中,流動(dòng)相組成恒定,但脫氣仍為必要步驟以確保基線穩(wěn)定。
2、進(jìn)樣系統(tǒng):
組成:常用高壓六通進(jìn)樣閥或自動(dòng)進(jìn)樣器。
功能:將樣品準(zhǔn)確、定量地引入流動(dòng)相,要求密封性良好、死體積小、重復(fù)性好,且對(duì)色譜系統(tǒng)的壓力和流量波動(dòng)影響小。等度分析中,進(jìn)樣量恒定有助于提高分析重復(fù)性。
3、分離系統(tǒng):
組成:核心為色譜柱,通常由優(yōu)質(zhì)不銹鋼制成,內(nèi)裝填料(固定相)。
功能:
色譜柱:利用固定相與樣品中各組分的相互作用差異(如分配系數(shù)、吸附能力)實(shí)現(xiàn)分離。等度分析中,流動(dòng)相組成恒定,分離效果主要取決于色譜柱的選擇性和柱效。
保護(hù)柱:常配備于分析柱前,防止污染和堵塞,延長(zhǎng)分析柱壽命。
4、檢測(cè)系統(tǒng):
組成:常見檢測(cè)器包括紫外吸收檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器等。
功能:將柱流出物中的樣品組成和含量變化轉(zhuǎn)化為可檢測(cè)信號(hào)(如電信號(hào))。等度分析中,檢測(cè)器需具備高靈敏度和穩(wěn)定性,以準(zhǔn)確檢測(cè)微量組分。
5、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng):
組成:現(xiàn)代液相色譜儀通常配備色譜工作站或計(jì)算機(jī)軟件。
功能:
數(shù)據(jù)采集與存儲(chǔ):實(shí)時(shí)記錄檢測(cè)器輸出的電信號(hào)。
數(shù)據(jù)處理與分析:生成色譜圖,計(jì)算峰面積、保留時(shí)間等參數(shù),實(shí)現(xiàn)定量和定性分析。等度分析中,數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)可簡(jiǎn)化復(fù)雜樣品的分析過(guò)程,提高分析效率。
